凯氏定氮法测定蛋白质含量，凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理

大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于凯氏定氮法测定蛋白质含量的问题，于是小编就整理了4个相关介绍凯氏定氮法测定蛋白质含量的解答，让我们一起看看吧。

什么是凯氏定氮法？

凯氏定氮法是由丹麦化学家凯道尔创建的一种常量、微量、平微量凯氏定氮法以及自动定氮仪法等，是分析有机化合物含氮量的常用方法。

凯氏定氮法的理论基础是蛋白质中的含氮量通常占其总质量的16%左右(12%~一19%),因此，通过测定物质中的含氮量便可估算出物质中的总蛋白质含量(假设测定物质中的氮全来自蛋白质)，即: 蛋白质含量=含氮量/16%。 凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收，再以标准盐酸滴定，就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法

凯氏定氮法公式解释？

凯氏定氮法计算公式：X=*F*100%。式中，X表示样品中蛋白质的百分含量，V1表示样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积，V2表示试剂空白消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积，N表示硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度，0。014表示1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数，m表示样品的质量或体积，F表示氮换算为蛋白质的系数。

(V1-V2)*C*0.0140*6.25/m

其中V1是滴定时消耗盐酸的量（毫升），

V2是空白实验所消耗的盐酸量（毫升），

C是盐酸标准液浓度（摩尔/升），

m是样品质量（克），

6.25为氮换算为蛋白质的平均系数

蛋白质含量计算过程？

蛋白质含量的计算过程：

蛋白质含量==蛋白质中含氮量x6.25----凯氏定氮法

蛋白质的元素分析主要包括碳，氢，氧，氮，硫等，平均含氮量为16%

所以通过含氮量，除以16%（即乘以6.25），即可求出蛋白质含量。

定氮法测定蛋白质的原理？

定氮法测定蛋白质的是通过测出样品中的总含氮量再乘以相应的蛋白质系数而求出蛋白质的含量,此法的结果称为粗蛋白质含量。

 原理：有机含氮化合物与浓硫酸共热消化，氮转化为氨，再与硫酸结合成硫酸铵。硫酸铵与强碱反应，放出氨。将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中，再用标准碱溶液进行滴定。根据测得的氨量，计算样品的总氮量。、试剂与材料：浓硫酸、硫酸钾-硫酸铜粉末(称取80g硫酸钾和20g硫酸铜(五水)，0.3g二氧化硒研细混合)、30%氢氧化钠溶液、2%硼酸溶液、0.01M标准盐酸、混合指示剂(田氏指示剂)储存液(取50ml0.1%甲烯蓝乙醇溶液与200ml0.1%甲基红溶液混合，储存于棕色瓶中备用。

克氏定氮法 ：天然含氮有机化合物（如蛋白质）与浓硫酸共热时分解出氨，氨与硫酸反应生成硫酸铵。在克氏定氮仪中加入强碱碱化消化液，使硫酸铵分解出氨。用水蒸气蒸馏法将氨蒸入硼酸溶液中，然后再用标准稀硫酸酸溶液进行滴定，滴定所用稀硫酸酸的量（mol）相当于被测样品中氨的量（mol），根据所测得的氨量即可计算样品的含氮量。

　　原理是因为蛋白质含氮量通常在16%左右，所以将克氏定氮法测得的含氮量乘上系数6.25，便得到该样品的蛋白质含量。

定氮法是一种常用的测定蛋白质含量的方法，它的原理是基于蛋白质中含有相对稳定的氮元素，通过氧化或者加热处理蛋白质，在高温和酸性条件下，其中的氮元素会转化成氨和高锰酸钾会氧化氨，生成氮气，而测定氮气的体积或重量即可计算蛋白质的含量。
这种方法具有灵敏度高、可靠性好、样品量小等特点，但也存在着运用范围受限、必需全燃烧等缺陷，需要在实际操作中结合具体情况加以掌握。

到此，以上就是小编对于凯氏定氮法测定蛋白质含量的问题就介绍到这了，希望介绍关于凯氏定氮法测定蛋白质含量的4点解答对大家有用。