硫酸铵沉淀蛋白质(硫酸铵沉淀蛋白质方法)
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本文目录一览:
- 1、向鸡蛋清中加饱和硫酸铵溶液出现白色沉淀,为什么不是化学变化?
- 2、用硫酸铵为什么可使蛋白质从溶液中沉淀析出
- 3、在硫酸铵分级沉淀蛋白质的注意事项
- 4、硫酸铵沉淀法的原理及步骤
向鸡蛋清中加饱和硫酸铵溶液出现白色沉淀,为什么不是化学变化?
由于盐析时,并未发生化学反应,即蛋白质分子发生改变,所以不是化学的原因。
不为化学变化。蛋白质溶液的稳定因素有质点大小、电荷和水化作用。
饱和硫酸铵沉淀蛋白质不是化学反应,属于物理变化,又称为蛋白质的盐析。蛋白质溶解在水中,是以胶体的形式存在的。蛋白质胶体带同种电荷,因此胶体颗粒之间互相排斥,不会聚集成为大颗粒,保持稳定的悬浮于溶液中的状态。
加入饱和硫酸铵溶液,使蛋白质在水中的溶解度降低,所以蛋白质会从水中析出,这叫“盐析”。如果继续加入蒸馏水,蛋白质又会重新溶解,说明它没有发生变性,即不是化学反应。
硫酸铵浓溶液可降低蛋白质的溶解度使蛋白质脱水凝聚而盐析。这个过程是物理变化,不是化学变化,蛋白质分子没有改变。
用硫酸铵为什么可使蛋白质从溶液中沉淀析出
因为硫酸铵能降低蛋白质在溶液中的溶液解,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种现象叫做盐析,属于物理变化,加水稀释后又可复原。
高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子,从而破坏蛋白质表面的水化膜,降低其溶解度,使之从溶液中沉淀出来。各种蛋白质的溶解度不同,因而可利用不同浓度的盐溶液来沉淀不同的蛋白质。这种方法称之为盐析。
盐析是通过向蛋白质溶液中加入高浓度中性盐(如硫酸铵),致使蛋白质发生沉淀的蛋白质分离技术。
鸡蛋清溶液加入饱和硫酸铵后分层的现象是因为蛋白质遇到盐类发生了盐析而分层。具体来说,加入蒸馏水的鸡蛋清是蛋白质胶体溶液,当加入饱和硫酸铵溶液时,会产生白色絮状沉淀,即蛋白质从溶液中析出,这种现象被称为盐析。
也就是说饱和硫酸铵溶液大大降低了蛋白质在水中的溶解度,而且以沉淀的形式析出。本质上,主要的原因是由于硫酸铵中和了蛋白质的电性,从而降低了蛋白质在水中的溶解能力。
在硫酸铵分级沉淀蛋白质的注意事项
1、干燥沉淀时,要控制好温度和时间,避免过度干燥或不足干燥。在称量沉淀时,要使用准确的称量器具,并进行准确的称量。
2、所以当你要溶解的蛋白质很多时,这是很累的步骤。然而硫酸铵饱和溶液比较麻烦只有在配制部分,要先加热让它饱合后,回到操作温度让它过饱和,最后用滤纸把硫酸铵结晶去掉。
3、硫酸铵可能会损坏某些蛋白。加入硫酸铵晶体时应小心:局部浓度过高可能会造成不需要的蛋白沉淀。对于常规可再生的纯化过程,可以避免使用硫酸铵沉淀以利于层析。通常沉淀对于浓度低于1mg/ml的蛋白几乎无效。
4、似乎是因为铵根过量时会结合成络合离子,这些络合离子的溶解度一般很高,所以沉淀又变可溶了。你问一下老师吧,任课老师不说你就去化学组,总有人爱你虚心好学,细细解释的。
5、使用硫酸铵沉淀蛋白需要注意:硫酸铵中常含有少量的重金属离子,对蛋白质巯基有敏感作用,使用前必须用H2S处理:将硫酸铵配成浓溶液,通入H2S饱和,放置过夜,用滤纸除去重金属离子,浓缩结晶,100℃烘干后使用。
6、) 盐的选择 蛋白质沉淀时,常用(NH4)2SO4 优点:溶解度大,且对温度不敏感;分级效果好;有稳定蛋白质结构的作用;价廉,废液可作肥料。缺点:沉淀后样品需脱盐。
硫酸铵沉淀法的原理及步骤
沉淀形成:随着硫酸铵试剂的加入,溶液中的目标物质与硫酸铵反应生成沉淀。沉淀的形成速度和形态取决于目标物质的性质和实验条件。过滤沉淀:当沉淀形成后,使用漏斗和过滤纸将溶液中的沉淀分离出来。
高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子,从而破坏蛋白质表面的水化膜,降低其溶解度,使之从溶液中沉淀出来。各种蛋白质的溶解度不同,因而可利用不同浓度的盐溶液来沉淀不同的蛋白质。这种方法称之为盐析。
蛋白质 碰到一些盐类会盐析——蛋白质表面带 正电 ,彼此排斥。加入盐类后以盐中的 阴离子 为中心抱团吸附,结块沉降。
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