蛋白质的鉴定实验步骤,蛋白质的鉴定实验步骤高中生物
大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于蛋白质的鉴定实验步骤的问题,于是小编就整理了3个相关介绍蛋白质的鉴定实验步骤的解答,让我们一起看看吧。
生物化学白蛋白测定实验步骤?
取血清或血浆 2 mL,加入 3 mL 0.1 mol/L 氢氧化钠溶液,混匀; 加入 1 mL 10% 硫酸铜溶液,混匀,静置 10 min; 加入 3 mL 20% 三氯乙酸溶液,混匀,静置 10 min; 10000 r/min 离心 10 min; 取上清液 2 mL,加入 1 mL 5% 氢氧化钠溶液,混匀; 加入 5 mL 福林酚试剂,混匀; 37℃ 水浴 30 min; 525 nm 比色计测定吸光度。
检测糖类脂肪蛋白质,材料和试剂,和颜色变化怎么记住?
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 实验目的 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质,阐明实验原理—颜色反应,识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色,初步掌握鉴定上述化合物的基本方法,学会描述实验现象,掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。 实验材料 苹果或梨匀浆,花生种子,鸡蛋清,马铃薯匀浆。 实验用具 双面刀片、试管(最好用刻度试管)、试管夹、试管架、大小烧杯、小量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜 实验步骤 还原性糖的鉴定 实验原理 还原性糖 试剂 → 色沉淀 实验材料 实验 步骤
1、制备样液
2、取样(2mL注入试管)
3、加入刚刚混合均匀的 试剂1mL
4、水浴加热2分钟
5、观察颜色变化,预期将由 色变为 色。 淀粉的鉴定 实验原理 淀粉 → 色 实验材料 实验步骤 1、取样2mL 2、加入 ,观察颜色变化。 蛋白质的鉴定 实验原理 蛋白质 试剂 → 色 实验材料 实验 步骤 1、制备样液 2、取样2mL 3、加入 试剂的 液1mL,摇匀 4、加入 试剂的 液4滴,摇匀 5、观察颜色变化 脂肪的鉴定 实验原理 脂肪 试剂→ 色 实验材料 实验 步骤 1、制备材料(去种皮,切薄片) 2、加 试剂染色 分钟 3、用 试剂去薄片上的浮色 4、制成临时装片 5、放在显微镜下观察(先用低倍镜再转高倍镜)
wb实验的原理和步骤?
WB实验的基本原理:
蛋白质免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志,检测蛋白质的方法很多,除 ELISA 法外,也可用与检测 DNA 和 RNA 相类似的吸印方法。
与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。
经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。
三、WB实验步骤
(一)试剂准备
(二)蛋白样品制备
(三) 蛋白含量的测定
(四)SDS-PAGE电泳
(五)转膜
(六)免疫反应
(七)化学发光,显影,定影
(八)凝胶图象分析
到此,以上就是小编对于蛋白质的鉴定实验步骤的问题就介绍到这了,希望介绍关于蛋白质的鉴定实验步骤的3点解答对大家有用。