蛋白质双缩脲颜色,蛋白质双缩脲颜色变化
大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于蛋白质双缩脲颜色的问题,于是小编就整理了3个相关介绍蛋白质双缩脲颜色的解答,让我们一起看看吧。
蛋白质高温变性失活加双缩脲试剂会出现颜色反应吗?
双缩脲试剂是由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.01g/mL的CuSO4组成的可看出碱是过量的,而蛋白质的鉴定是因为肽健与二价铜离子在碱性条件下结合成了紫色的络合物,因为肽健与双缩脲结构相似
双缩脲试剂能用来检测蛋白酶吗?
能。
能,蛋白酶也是一种蛋白质。
双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。鉴定反应蛋白质单位1-10mg。
斐林试剂和双缩脲试剂有什么区别?
1、作用不同:斐林试剂是新配制的溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应。
2、配置方法不同:
斐林试剂配制方法:0.1 g/mI NaOH(甲液)和0.05 g/mI CuSO4(乙液)。甲液配制方法是将50 g氢氧化钠和137 g酒石酸钾钠溶于500 mI蒸馏水中(贮于带橡皮塞的瓶中)。乙液配制方法是将34.5 g结晶硫酸铜溶于500 ml水中,加0.5 mI硫酸。混合均匀。
双缩脲试剂A是质量分数为0.1 g/mL的NaOH水溶液;双缩脲试剂B是质量分数为0.01 g/mL的CuSO4水溶液.先在待测液中加入双缩脲试剂A 3mL,振荡均匀(营造碱性环境),再加入1~2滴双缩脲试剂B,振荡均匀。
3、使用方法不同:
斐林试剂使用时,先反溶液和溶液混合(将滴溶液滴入溶液中),而后立即使用。
双缩脲试剂使用时,先加入溶液(2mL),振荡摇匀,造成碱性的反应环境,然后再加入3~4滴溶液,振荡摇匀后观察现象。
检验还原性糖用斐林试剂,检验蛋白质用双缩脲试剂。
区别:
(1)溶液浓度不一样
斐林试剂的浓度事0.1mol/LNaOH+0.05mol/LCuSO4;双缩脲试剂的浓度是0.1mol/LNaOH+0.01mol/LCuSO4
(2)使用原理不一样
斐林试剂在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的沉淀,用来鉴定可溶性还原糖的存在,它是新配制的溶液。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化会从浅蓝色到棕色再到砖红色。我们常用双缩脲法来鉴定生物组织中是否含有蛋白质,用的是双缩脲试剂,会发生双缩脲反应。在碱性环境下的与双缩脲试剂发生的紫色反应是双缩脲反应的实质。由于蛋白质分子中有着和双缩脲试剂结构相似的肽键,蛋白质与双缩脲试剂发生颜色反应,因此,双缩脲试剂可以用来鉴定蛋白质的存在。
(3)使用方法不一样
使用斐林试剂的时候,先把滴溶液滴入溶液中,一定要立即使用;使用双缩脲试剂的时候,先把2mL溶液振荡摇匀,形成碱性的反应环境,最后加入三到四滴溶液,摇匀之后观察现象。
到此,以上就是小编对于蛋白质双缩脲颜色的问题就介绍到这了,希望介绍关于蛋白质双缩脲颜色的3点解答对大家有用。