茚三酮与蛋白质反应，茚三酮与蛋白质反应颜色变化

大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于茚三酮与蛋白质反应的问题，于是小编就整理了2个相关介绍茚三酮与蛋白质反应的解答，让我们一起看看吧。

蛋白质侧链基团参与的颜色反应有哪些？

蛋白质侧链基团参与的颜色反应有:

①【茚三酮反应】

α-氨基酸与水化茚三酮（苯丙环三酮戊烃）作用时，产生蓝色反应，由于蛋白质是由许多α-氨基酸组成的，所以也呈此颜色反应。

②【双缩脲反应】

蛋白质在碱性溶液中与硫酸铜作用呈现紫红色，称双缩脲反应。凡分子中含有两个以上－CO－NH－键的化合物都呈此反应，蛋白质分子中氨基酸是以肽键相连，因此，所有蛋白质都能与双缩脲试剂发生反应。

③【米伦反应】

蛋白质溶液中加入米伦试剂（亚硝酸汞、硝酸汞及硝酸的混和液），蛋白质首先沉淀，加热则变为红色沉淀，此为酪氨酸的酚核所特有的反应，因此含有酪氨酸的蛋白质均呈米伦反应。

蛋白质所带电荷与哪些因素有关？

蛋白质所带电荷取决于它的等电点(PI)和层析柱中的pH值。

　　当柱中的pH低于蛋白质的PI时，蛋白质带正电荷，且不与阴离于交换剂结合。而随着洗脱剂向前移动，固定相中的pH值是随着淋洗时间延长而变化的。Westernblot法和Digital PCR及微滴式PCR方法，当蛋白质移动至环境pH高于其PI时，蛋白质由带正电行变为带负电荷，并与阴离子交换剂结合。由于洗脱剂的通过，蛋白质周围的环境pH 再次低于PI时，它又带正电荷，并从交换剂解吸下来。随着洗脱液向柱底的迁移，上述过程将反复进行，于是各种蛋白质就在各自的等电点被洗下来，从而达到了分离的目的。

　　聚焦层析柱中的pH梯度溶液是在淋洗过程中自动形成的，但是随着淋洗的进行，pH梯度会逐渐向下迁移，从底部流出液的pH却由9逐渐降至6，并最后恒定于此值，这时层析柱的pH梯度也就消失了。

　　上面介绍的亲和层析法亦称特异性配体亲和层析法。除此之外，还有一种亲和层析法叫通用性配体亲和层析法。Westernblot法和Digital PCR及微滴式PCR方法，这两种亲和层析法相比，前者的配体一般为复杂的生命大分子物质(如抗体、受体和酶的类似底物等)，它具有较强的吸附选择性和较大的结合力。而后者的配体则一般为简单的小分子物质(如金属、染料，以及氨基酸等)，它成本低廉、具有较高的吸附容量，通过改善吸附和脱附条件可提高层析的分辨率。

　　在离子交换层析中，pH梯度溶液的形成是靠梯度混合仪实现的。例如，当使用阴离子交换剂进行层析时，制备pH由高到低呈线性变化的梯度溶液的方法是，Westernblot法和Digital PCR及微滴式PCR方法，在梯度仪的混合室中装高pH溶液，而在另一室装低pH极限溶液，然后打开层析柱的下端出口，让洗脱液连续不断地流过柱体。这时从柱的上部到下部溶液的pH值是由高到低变化的。

　 　而在聚焦层析中，当洗脱液流进多缓冲交换剂时，由于交换剂带具有缓冲能力的电荷基团，故pH梯度溶液可以自动形成。例如，当柱中装阴离子交换剂PBE94(作固定相)时，先用起始缓冲液平衡到pH9，再用含pH6的多缓冲剂物质(作流动相)的淋洗液通过柱体，这时多缓冲剂中酸性最强的组分与碱性阴离子交换对结合发生中和作用。Westernblot法和Digital PCR及微滴式PCR方法，随着淋洗液的不断加入，柱内每点的pH值从高到低逐渐下降。

到此，以上就是小编对于茚三酮与蛋白质反应的问题就介绍到这了，希望介绍关于茚三酮与蛋白质反应的2点解答对大家有用。